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Invitrogen T7 體外轉錄試劑盒

  • 更新時間:  2024-05-06
  • 產品型號:  AM1344
  • 簡單描述
  • Invitrogen T7 體外轉錄試劑盒
    內容與儲存
    T7 酶混合物、10X 反應緩沖液 2XNTP?CAP 溶液、GTP 溶液、pTRI-Xef、TURBO DNase、醋酸銨終止液、氯化鋰沉淀溶液和凝膠上樣緩沖液 II 均儲存在 –20°C 下。可在任何溫度下儲存無核酸酶水。
詳細介紹

Invitrogen T7 體外轉錄試劑盒


mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒設計用于體外合成大量的加帽 RNA。加帽 RNA 可模擬體內發現的大多數真核 mRNA,因為其在 5' 末端有一個 7-甲基鳥苷帽結構。mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒反應包括超高得率轉錄反應中的帽類似物 [m7G(5')ppp(5')G]。帽類似物僅作為轉錄本的第一個或 5' 末端 G 摻入,因為其結構使得無法在 RNA 分子中的其他位點將其摻入。

mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒工作原理
mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒有簡化的反應形式,其中所有 4 種核糖核苷酸和帽類似物混合于單一溶液中。該溶液的帽類似物:GTP 比值為 4:1,這適用于盡可能提高 RNA 得率和加帽轉錄本比例。mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒適用于卵母細胞顯微注射用加帽 RNA 常規合成、體外翻譯、轉染和其他應用。在存在高核苷酸濃度的情況下,通過優化 RNA 合成的反應條件來實現高得率。此外,合成的 RNA 不會被任何可能含有 RNase 抑制劑(酶混合物的組成部分)的污染性核糖核酸酶降解。

使用 mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒
在 20 µL 反應中,在 2 小時孵育期間,mMESSAGE mMACHINE™ 高得率加帽 RNA 轉錄將生成大量的加帽 RNA。該方法獲得的得率為使用常規體外轉錄反應的 10–50 倍。帽類似物與 GTP 的比值已經過優化,能夠在得率 (15–35 µg) 與加帽轉錄本的比例 (80%) 之間實現良好折衷。mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒還包含一份 LiCl 沉淀溶液,該溶液可高效分離來自加帽 RNA 的蛋白和未摻入的核苷酸(包括游離帽類似物),提高翻譯效率。mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒僅針對與試劑盒中包含的聚合酶配合使用進行了優化。使用不同的聚合酶可能會導致得率低。mMESSAGE mMACHINE™ 試劑盒包含 25 次轉錄反應所需的所有緩沖液和試劑。使用試劑盒提供的對照模板(非洲蟾蜍延伸因子 1α,pTRI Xef),每次 mMESSAGE mMACHINE™ 反應將使用 T3 或 T7 RNA 聚合酶生成約 20–30 µg 的 RNA,或使用 SP6 RNA 聚合酶生成約 15–25 µg RNA。



Invitrogen T7 體外轉錄試劑盒


規格

最終產品類型
合成 mRNA, mRNA
產品規格
試劑盒
樣品類型
mRNA, 合成 mRNA
適用于(應用)
In Vitro Transcription, synthetic mRNA, mRNA, transfection, LNPs, GENEart, linearized DNA plasmid, delivery, PCR products
反應次數
25 次反應
產品線
Ambion™、mMESSAGE mMACHINE™
產品類型
T7 體外轉錄試劑盒
數量
25 次反應
促進劑
T7
運輸條件
干冰
產量
20-30 µg
原始材料
PCR 產物、線性化 DNA 質粒

內容與儲存

T7 酶混合物、10X 反應緩沖液 2XNTP?CAP 溶液、GTP 溶液、pTRI-Xef、TURBO DNase、醋酸銨終止液、氯化鋰沉淀溶液和凝膠上樣緩沖液 II 均儲存在 –20°C 下。可在任何溫度下儲存無核酸酶水。




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